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激肽釋放酶2Elisa試劑盒使用操作流程和所需注意的事項

點擊次數(shù):686 更新時間:2022-05-18

   激肽釋放酶2Elisa試劑盒使用操作流程:

  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
  4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
  激肽釋放酶2Elisa試劑盒操作注意事項:
  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。-次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第1孔的OD值) , 請先用樣品稀釋液稀釋-定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請“后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5) 。
  5.封板膜只限- -次性使用,以避兔交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
  6.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。
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