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巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗中操作步驟和結(jié)果判斷

巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒操作步驟

1.取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品，用醫(yī)用蒸餾水替代)

2、分別標(biāo)記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;

4、將酶標(biāo)板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

6、巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。

8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。

9、將酶標(biāo)板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。

10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

11、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。

12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)

13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。

14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。

15、在酶標(biāo)儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。

16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本含量

巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒結(jié)果判斷

1. 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;

2、檢測值范圍：0-400pmol/L

3、敏感度：1.0pmol/L